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液相色譜法測定山藥中尿囊素的含量

更新時間:2009-10-22瀏覽:2527次

山藥為薯蕷科植物薯蕷Dioscorea opposita Thunb.的干燥根莖。

[產(chǎn)地]

原產(chǎn)于山西平遙、介休.現(xiàn)主產(chǎn)于河南新鄉(xiāng)地區(qū)的溫縣、孟縣、沁縣、博愛、武陟等縣,習(xí)稱"懷山藥"為道地藥材.是全國的四大懷藥之一.河北、陜西、江西、廣東等地亦產(chǎn)。

[采收加工]

冬季莖葉枯萎后采挖,切去根頭,洗凈,除去外皮及須根,用硫磺熏后,干燥;也有選擇肥大順直的干燥山藥,置清水中,浸至無干心,悶透,用硫磺熏后,切齊兩端,用木板搓成圓柱狀,曬干,打光,習(xí)稱"光山藥".在加工是切下斷頭長寸許的則稱為"段山"或"寸山",碎斷次貨稱"料山"。

[化學(xué)成分]

塊莖含皂苷、粘液質(zhì)、膽堿、淀粉(16%)、糖蛋白和自由氨基酸,還含枝杈素(d-abscisinⅡ)、多酚氧化霉、維生素C(5mg、3,4,-二羥基苯乙胺,粘液中含甘露聚糖(mannan)與植酸(phytic acid).日本薯蕷含薯蕷皂苷(dioscin,其苷元為薯蕷皂苷元,也是薯蕷屬植物塊莖常有的成分[1]。

還含膽堿(choline)、脫落素(abscisin)、尿囊素(allantoin)多巴胺、(dopamine)、山藥堿(batatasine)[2]。

[主要成分理化性質(zhì)和藥理作用]

尿囊素:分子式C4H6N4O3,分子量158.12,單斜片狀結(jié)晶或棱柱結(jié)晶(水),熔點238。Lg溶于190ml水,500ml乙醇,在熱水和熱乙醇中溶解度更大。幾乎不溶于乙醚[3]

尿囊素具有鎮(zhèn)靜作用,其里鋁鹽有除臭及收斂作用。

[含量測定]

山藥中尿囊素的含量測定[4]

[色譜條件]

色譜柱:Zorbax ODS C18250mm×4.6mm,保護(hù)柱:Zorbax ODS (20mm×2.0mm;流動相:甲醇-氯仿-水(0.50.012100);流速:0.5ml/min;檢測波長:224nm;柱溫:35

[供試品的制備]

取本品粉末約0.5g,精密稱定,加水1ml潤濕,加甲醇7ml,超聲20min定容,振蕩,于4靜置,沉淀糖類、淀粉、蛋白質(zhì)等醇不溶物,吸取上清液0.5ml,揮去甲醇,用純水0.5ml40超聲或振蕩溶解尿囊素,高速離心10min,吸取0.2ml用甲醇再生,并以純水平衡的Sep pak C18小柱,用純水3ml       洗滌,濾過,濾液定容至5ml,取部分溶液與4000轉(zhuǎn)/min。按本法色譜條件進(jìn)行測定,結(jié)果見下圖

 

 

                  

                                                         

a對照品;b樣品;1尿囊素

[討論]

根據(jù)尿囊素溶于熱水和甲醇的性質(zhì),本法設(shè)計了用水溶解后加甲醇提取尿囊素和蛋白質(zhì)、淀粉、糖,同時樣品制備的方法。繼而以水取代提取液中甲醇,除去水不溶物,再將樣品的水溶液通過C18

小柱凈化,尿囊素獲較好的回收,而流動相較難洗提的中草藥中的成分則留于C18小柱上端,避免了對尿囊素測定的干擾,簡化了樣品前處理步驟以獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。

 

參考文獻(xiàn)

1.       江蘇新醫(yī)學(xué)院編,中藥大辭典,上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1984

2.       沙世炎,徐禮焱編,中草藥有效沉浮分析法,北京:人民衛(wèi)生出版社,1986

3.       國家醫(yī)要管理局中草藥情報中心站編,植物藥有效成分手冊,北京:人民衛(wèi)生出版社,1986

4.       宋金春,楊芝,羅順德等,反相液相色譜測定山藥中尿囊素的含量,中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2001217):413

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